無需衍生化快速檢測20種氨基酸的LC-MS方法

液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)（LC-MS）具有復(fù)雜樣品分離能力，高靈敏度等優(yōu)勢，目前在藥物、食品、質(zhì)檢等行業(yè)應(yīng)用越來越廣泛。本應(yīng)用概述了一種LC-MS/MS方法，用于分析所有20種氨基酸，以往使用高效液相色譜檢測氨基酸時(shí)，待測樣品需要衍生化，且衍生步驟繁瑣，操作復(fù)雜，耗時(shí)較長。本應(yīng)用特點(diǎn)在于所檢測20種氨基酸，均無需衍生化。

色譜條件

色譜柱：Super™Carbon LC, 10cm x 2.1 mm I.D, 2.7 μm；

流動(dòng)相：[A]水(0.1% (v/v) 二氟乙·酸(DFA))；[B]乙腈(0.1% (v/v) 二氟·乙酸(DFA))

梯度：

流速：0.2 mL/min；

柱溫：12°C；

檢測器：MSD；

進(jìn)樣量：1.0 μL；

樣品：不同濃度的氨基酸混合物；

稀釋劑：水(0.1% (v/v)二氟·乙酸(DFA))

結(jié)果

圖1. 20種未衍生化氨基酸的HPLC圖譜

表1. 20種未衍生化氨基酸的保留時(shí)間

表2. 20種未衍生化氨基酸的MS分離條件

表3. 20種未衍生化氨基酸MRM裂解參數(shù)和離子

結(jié)論

該應(yīng)用證明了利用LC-MS/MS技術(shù)采用對(duì)應(yīng)級(jí)別的溶劑和試劑，配合Super™Carbon LC色譜柱，在不需要衍生化試劑的情況下，仍可用于20種氨基酸的檢測，避免了衍生化/未衍生化氨基酸的存在以及衍生化試劑本身的干擾，且與大多數(shù)商業(yè)方法相比，耗時(shí)更短。